1. Amaç: Bu prosedür, aseptik operasyonlar ve steril odaların korunması için standart bir prosedür sağlamayı amaçlamaktadır.
2. Uygulama kapsamı: biyolojik test laboratuvarı
3. Sorumlu Kişi: QC Süpervizörü Test Uzmanı
4.Tanım: Yok
5. Güvenlik önlemleri
Mikrobiyal kontaminasyonu önlemek için aseptik operasyonlar titizlikle yapılmalıdır; operatörler steril odaya girmeden önce UV lambasını kapatmalıdır.
6.Prosedürler
6.1. Steril oda, steril bir ameliyathane ve bir tampon oda ile donatılmalıdır. Steril ameliyathanenin temizliği 10000 sınıfına ulaşmalıdır. İç ortam sıcaklığı 20-24°C, nem ise %45-60 arasında tutulmalıdır. Temiz tezgah temizliği 100 sınıfına ulaşmalıdır.
6.2. Steril oda temiz tutulmalı, kontaminasyonu önlemek için döküntülerin yığılması kesinlikle yasaktır.
6.3. Tüm sterilizasyon ekipmanlarının ve kültür ortamlarının kontaminasyonunu kesinlikle önleyin. Kontamine olanlar bunları kullanmayı bırakmalıdır.
6.4. Steril oda, %5 kresol solüsyonu, %70 alkol, %0,1 klormetiyonin solüsyonu vb. gibi çalışma konsantrasyonlu dezenfektanlarla donatılmalıdır.
6.5. Steril oda temizliğinin gerekliliklere uygun olmasını sağlamak için steril oda düzenli olarak sterilize edilmeli ve uygun dezenfektanla temizlenmelidir.
6.6. Steril odaya getirilmesi gereken tüm alet, ekipman, kap ve diğer malzemeler sıkıca sarılmalı ve uygun yöntemlerle sterilize edilmelidir.
6.7. Steril odaya girmeden önce, personel ellerini sabun veya dezenfektanla yıkamalı ve ardından tampon odada özel iş kıyafetleri, ayakkabılar, şapkalar, maskeler ve eldivenler giymelidir (veya ellerini tekrar %70 etanol ile silmelidir). İşlemleri bakteri odasında gerçekleştirmelidir.
6.8. Steril oda kullanılmadan önce, steril odadaki ultraviyole lamba ışınlama ve sterilizasyon için 30 dakikadan fazla çalıştırılmalı ve aynı anda temiz tezgah hava üflemesi için çalıştırılmalıdır. Ameliyat tamamlandıktan sonra, steril oda zamanında temizlenmeli ve ardından 20 dakika boyunca ultraviyole ışıkla sterilize edilmelidir.
6.9. Muayene öncesinde, kontaminasyonu önlemek için test numunesinin dış ambalajı bozulmadan saklanmalı ve açılmamalıdır. Muayene öncesinde, dış yüzeyi dezenfekte etmek için %70 alkollü pamuk topları kullanın.
6.10. Her operasyon sırasında aseptik operasyonun güvenilirliğini kontrol etmek amacıyla negatif kontrol yapılmalıdır.
6.11. Bakteriyel sıvıyı emerken, emmek için bir vakum topu kullanmalısınız. Pipete doğrudan ağzınızla dokunmayın.
6.12. Aşı iğnesi her kullanımdan önce ve sonra alevle sterilize edilmelidir. Soğuduktan sonra kültür aşılanabilir.
6.13. Bakteriyel sıvı içeren pipetler, test tüpleri, petri kapları ve diğer gereçler, dezenfeksiyon için %5 Lysol solüsyonu içeren bir sterilizasyon kovasına batırılmalı ve 24 saat sonra çıkarılıp durulanmalıdır.
6.14. Masaya veya zemine bakteriyel sıvı dökülürse, kirlenmiş bölgeye en az 30 dakika boyunca %5 karbolik asit solüsyonu veya %3 Lysol dökerek müdahale etmelisiniz. İş kıyafetleri ve şapkalar bakteriyel sıvıyla kirlendiğinde, derhal çıkarılmalı ve yüksek basınçlı buhar sterilizasyonundan sonra yıkanmalıdır.
6.15. Canlı bakteri içeren tüm eşyalar musluk altında durulanmadan önce dezenfekte edilmelidir. Kanalizasyonun kirletilmesi kesinlikle yasaktır.
6.16. Steril odadaki koloni sayısı aylık olarak kontrol edilmelidir. Temiz tezgah açıkken, iç çapı 90 mm olan birkaç steril petri kabı alın ve eritilmiş ve yaklaşık 45°C'ye soğutulmuş yaklaşık 15 ml besin agar kültür ortamını aseptik olarak enjekte edin. Katılaştıktan sonra, 30 ila 35°C'de ters çevirerek yerleştirin. 48 saat boyunca ℃'lik bir inkübatörde inkübe edin. Steril olduklarından emin olduktan sonra, 3 ila 5 plak alın ve çalışma pozisyonunun soluna, ortasına ve sağına yerleştirin. Kapağı açıp 30 dakika beklettikten sonra, 30 ila 35°C'lik bir inkübatörde 48 saat boyunca ters çevirerek yerleştirin ve çıkarın. inceleyin. Sınıf 100 temiz alanda plaktaki çeşitli bakteri sayısının ortalaması 1 koloniyi, sınıf 10000 temiz odadaki ortalama sayı ise 3 koloniyi geçmemelidir. Eğer limit aşılırsa, steril oda tekrarlanan kontrollerle gereklilikler sağlanana kadar iyice dezenfekte edilmelidir.
7. "İlaç Hijyenik Muayene Yöntemleri" ve "İlaç Muayenesi için Çin Standart İşletim Uygulamaları"nın (Sterilite Muayene Yöntemi) bölümüne bakın.
8. Dağıtım Departmanı: Kalite Yönetim Departmanı
Temiz oda teknik kılavuzu:
Steril bir ortam ve steril malzemeler elde ettikten sonra, bilinen belirli bir mikroorganizmayı incelemek veya işlevlerinden yararlanmak için steril bir durum sağlamalıyız. Aksi takdirde, dışarıdan çeşitli mikroorganizmalar kolayca karışabilir. Dışarıdan alakasız mikroorganizmaların karışması olgusuna mikrobiyolojide kontamine edici bakteri denir. Kontaminasyonun önlenmesi, mikrobiyolojik çalışmalarda kritik bir tekniktir. Bir yandan tam sterilizasyon, diğer yandan kontaminasyonun önlenmesi, aseptik tekniğin iki yönüdür. Ayrıca, özellikle doğada bulunmayan patojenik mikroorganizmalar veya genetiği değiştirilmiş mikroorganizmalar olmak üzere, incelenen mikroorganizmaların deney kaplarımızdan dış ortama kaçmasını engellemeliyiz. Bu amaçlar için mikrobiyolojide birçok önlem mevcuttur.
Steril oda genellikle mikrobiyoloji laboratuvarında özel olarak kurulan küçük bir odadır. Levha ve camdan yapılabilir. Alanı çok büyük olmamalı, yaklaşık 4-5 metrekare ve yüksekliği yaklaşık 2,5 metre olmalıdır. Steril odanın dışına bir tampon oda kurulmalıdır. Çeşitli bakterilerin içeri girmesini önlemek için tampon odanın kapısı ile steril odanın kapısı aynı yöne bakmamalıdır. Hem steril oda hem de tampon oda hava geçirmez olmalıdır. İç havalandırma ekipmanlarında hava filtreleme cihazları bulunmalıdır. Steril odanın zemini ve duvarları pürüzsüz, kir tutması zor ve temizlenmesi kolay olmalıdır. Çalışma yüzeyi düz olmalıdır. Hem steril oda hem de tampon oda ultraviyole ışıklarla donatılmıştır. Steril odadaki ultraviyole ışıklar çalışma yüzeyinden 1 metre uzaktadır. Steril odaya giren personel sterilize edilmiş giysiler ve şapkalar giymelidir.
Günümüzde steril odalar çoğunlukla mikrobiyoloji fabrikalarında bulunurken, genel laboratuvarlar temiz tezgah (clean bench) kullanmaktadır. Temiz tezgahın temel işlevi, çalışma yüzeyindeki mikroorganizmalar da dahil olmak üzere çeşitli küçük tozları laminar hava akış cihazı kullanarak gidermektir. Elektrikli cihaz, havanın HEPA filtreden geçmesini ve ardından çalışma yüzeyine girmesini sağlayarak çalışma yüzeyinin sürekli akan steril havanın kontrolü altında kalmasını sağlar. Ayrıca, dışarıdan bakteri girişini önlemek için dışarıya yakın tarafta yüksek hızlı bir hava perdesi bulunur.
Zorlu koşullarda, temiz tezgah yerine ahşap steril kutular da kullanılabilir. Steril kutunun yapısı basittir ve taşınması kolaydır. Kutunun ön tarafında, çalışmadığı zamanlarda itme-çekme kapaklarıyla kapatılan iki delik bulunur. Çalışma sırasında kollarınızı uzatabilirsiniz. Ön kısmın üst kısmı, iç işleyişi kolaylaştırmak için camla donatılmıştır. Kutunun içinde bir ultraviyole lamba bulunur ve yan taraftaki küçük kapaktan mutfak eşyaları ve bakterileri koyabilirsiniz.
Aseptik operasyon teknikleri günümüzde yalnızca mikrobiyolojik araştırma ve uygulamalarda önemli bir rol oynamakla kalmayıp, aynı zamanda birçok biyoteknolojide de yaygın olarak kullanılmaktadır. Örneğin, transgenik teknoloji, monoklonal antikor teknolojisi vb.
Gönderi zamanı: 06 Mart 2024