1. Amaç: Bu prosedür, aseptik operasyonlar ve steril odaların korunması için standartlaştırılmış bir yöntem sağlamayı amaçlamaktadır.
2. Uygulama alanı: Biyolojik test laboratuvarı
3. Sorumlu Kişi: Kalite Kontrol Amiri/Test Görevlisi
4. Tanım: Yok
5. Güvenlik önlemleri
Mikrobiyal kontaminasyonu önlemek için aseptik işlemleri titizlikle gerçekleştirin; operatörler steril odaya girmeden önce UV lambasını kapatmalıdır.
6. Prosedürler
6.1. Steril oda, steril bir ameliyat odası ve bir tampon oda ile donatılmalıdır. Steril ameliyat odasının temizliği 10000 sınıfına ulaşmalıdır. İç mekan sıcaklığı 20-24°C, nem oranı ise %45-60 arasında tutulmalıdır. Temiz tezgahın temizliği 100 sınıfına ulaşmalıdır.
6.2. Steril oda temiz tutulmalı ve kontaminasyonu önlemek için döküntülerin biriktirilmesi kesinlikle yasaktır.
6.3. Tüm sterilizasyon ekipmanlarının ve kültür ortamlarının kontaminasyonunu kesinlikle önleyin. Kontamine olanların kullanımı derhal durdurulmalıdır.
6.4. Steril oda, %5 kresol çözeltisi, %70 alkol, %0,1 klormetiyonin çözeltisi vb. gibi çalışma konsantrasyonunda dezenfektanlarla donatılmalıdır.
6.5. Steril odanın temizliğinin gereklilikleri karşıladığından emin olmak için, steril oda düzenli olarak uygun dezenfektanlarla sterilize edilmeli ve temizlenmelidir.
6.6. Steril odaya getirilmesi gereken tüm aletler, ekipmanlar, kaplar ve diğer malzemeler sıkıca sarılmalı ve uygun yöntemlerle sterilize edilmelidir.
6.7. Steril odaya girmeden önce, personel ellerini sabun veya dezenfektanla yıkamalı ve ardından tampon odada özel iş kıyafetleri, ayakkabı, şapka, maske ve eldiven giymeli (veya ellerini tekrar %70 etanol ile silmeli) ve steril odaya girmeden önce bakteriyel odada işlemleri gerçekleştirmelidir.
6.8. Steril odayı kullanmadan önce, steril odadaki ultraviyole lamba 30 dakikadan fazla süreyle ışınlama ve sterilizasyon için açılmalı ve aynı anda temiz tezgah hava üfleme için çalıştırılmalıdır. İşlem tamamlandıktan sonra, steril oda zamanında temizlenmeli ve ardından 20 dakika boyunca ultraviyole ışıkla sterilize edilmelidir.
6.9. Muayeneden önce, test örneğinin dış ambalajı bozulmamış halde tutulmalı ve kirlenmeyi önlemek için açılmamalıdır. Muayeneden önce, dış yüzeyi dezenfekte etmek için %70 alkol içeren pamuk topları kullanılmalıdır.
6.10. Her işlem sırasında, aseptik işlemin güvenilirliğini kontrol etmek için negatif kontrol yapılmalıdır.
6.11. Bakterili sıvıyı emerken, emme topu kullanmalısınız. Pipeti doğrudan ağzınızla temas ettirmeyin.
6.12. Aşılama iğnesi her kullanımdan önce ve sonra alevle sterilize edilmelidir. Soğuduktan sonra kültür aşılanabilir.
6.13. Bakteri içeren sıvı bulunan pipetler, deney tüpleri, petri kapları ve diğer mutfak eşyaları, dezenfeksiyon için %5'lik Lysol çözeltisi içeren bir sterilizasyon kovasına batırılmalı ve 24 saat sonra çıkarılıp durulanmalıdır.
6.14. Masa veya zemine bakterili sıvı dökülürse, müdahale etmeden önce kirlenmiş bölgeye derhal %5'lik karbolik asit çözeltisi veya %3'lük Lysol dökülmeli ve en az 30 dakika bekletilmelidir. İş kıyafetleri ve şapkalar bakterili sıvı ile kirlenirse, derhal çıkarılmalı ve yüksek basınçlı buhar sterilizasyonundan sonra yıkanmalıdır.
6.15. Canlı bakteri içeren tüm eşyalar, musluk altında durulanmadan önce dezenfekte edilmelidir. Kanalizasyonun kirletilmesi kesinlikle yasaktır.
6.16. Steril odadaki koloni sayısı aylık olarak kontrol edilmelidir. Temiz tezgah açıkken, iç çapı 90 mm olan birkaç steril petri kabı alın ve eritilmiş ve yaklaşık 45°C'ye soğutulmuş yaklaşık 15 ml besleyici agar kültür ortamını aseptik olarak enjekte edin. Katılaştıktan sonra, 30-35°C'lik bir inkübatörde 48 saat boyunca ters çevirerek inkübe edin. Sterilite kanıtlandıktan sonra, 3-5 adet petri kabı alın ve çalışma alanının soluna, ortasına ve sağına yerleştirin. Kapağı açıp 30 dakika boyunca açıkta bıraktıktan sonra, 30-35°C'lik bir inkübatörde 48 saat boyunca ters çevirerek inkübe edin ve çıkarın. İnceleyin. 100 sınıfı temiz bir alanda petri kabındaki ortalama bakteri sayısı 1 koloniyi, 10000 sınıfı temiz bir odadaki ortalama sayı ise 3 koloniyi geçmemelidir. Belirlenen limit aşılırsa, tekrarlanan denetimler gereklilikleri karşılayana kadar steril oda iyice dezenfekte edilmelidir.
7. "İlaç Hijyenik Muayene Yöntemleri" ve "Çin İlaç Muayenesi Standart İşletme Uygulamaları" kitaplarındaki (Sterillik Muayene Yöntemi) bölümüne bakınız.
8. Dağıtım Departmanı: Kalite Yönetim Departmanı
Temiz oda teknik kılavuzu:
Steril bir ortam ve steril malzemeler elde ettikten sonra, bilinen belirli bir mikroorganizmayı incelemek veya işlevlerinden yararlanmak için steril durumu korumamız gerekir. Aksi takdirde, dışarıdan çeşitli mikroorganizmalar kolayca karışabilir. Dışarıdan ilgisiz mikroorganizmaların karışması olgusuna mikrobiyolojide kontaminasyon bakterileri denir. Kontaminasyonu önlemek, mikrobiyolojik çalışmalarda kritik bir tekniktir. Bir yandan tam sterilizasyon, diğer yandan kontaminasyonun önlenmesi, aseptik tekniğin iki yönüdür. Ayrıca, özellikle doğada bulunmayan patojenik mikroorganizmalar veya genetik olarak değiştirilmiş mikroorganizmalar olmak üzere, incelenen mikroorganizmaların deney kaplarımızdan dış ortama kaçmasını önlememiz gerekir. Bu amaçlar için mikrobiyolojide birçok önlem vardır.
Steril oda genellikle mikrobiyoloji laboratuvarında özel olarak kurulan küçük bir odadır. Sac levha ve camdan yapılabilir. Alanı çok büyük olmamalı, yaklaşık 4-5 metrekare, yüksekliği ise yaklaşık 2,5 metre olmalıdır. Steril odanın dışında bir tampon oda kurulmalıdır. Hava akımının çeşitli bakterileri içeri taşımasını önlemek için tampon odanın kapısı ile steril odanın kapısı aynı yöne bakmamalıdır. Hem steril oda hem de tampon oda hava geçirmez olmalıdır. İç mekan havalandırma ekipmanında hava filtreleme cihazları bulunmalıdır. Steril odanın zemini ve duvarları pürüzsüz, kir tutmayan ve temizlenmesi kolay olmalıdır. Çalışma yüzeyi düz olmalıdır. Hem steril oda hem de tampon oda ultraviyole lambalarla donatılmıştır. Steril odadaki ultraviyole lambalar çalışma yüzeyinden 1 metre uzakta olmalıdır. Steril odaya giren personel sterilize edilmiş kıyafet ve şapka giymelidir.
Günümüzde steril odalar çoğunlukla mikrobiyoloji laboratuvarlarında bulunurken, genel laboratuvarlarda temiz tezgah kullanılmaktadır. Temiz tezgahın temel işlevi, çalışma yüzeyindeki mikroorganizmalar da dahil olmak üzere çeşitli küçük tozları laminar hava akışı cihazı kullanarak uzaklaştırmaktır. Elektrikli cihaz, havanın HEPA filtresinden geçmesini ve ardından çalışma yüzeyine girmesini sağlayarak, çalışma yüzeyinin sürekli olarak steril hava akışı altında kalmasını sağlar. Ayrıca, dışarıdan bakterili havanın girmesini önlemek için dışarıya yakın tarafta yüksek hızlı bir hava perdesi bulunmaktadır.
Zorlu koşulların olduğu yerlerde, temiz tezgah yerine ahşap sterilizasyon kutuları da kullanılabilir. Sterilizasyon kutusu basit bir yapıya sahiptir ve kolayca taşınabilir. Kutunun ön tarafında, çalışmadığı zamanlarda itme-çekme kapılarıyla kapatılan iki delik bulunur. Çalışma sırasında kollarınızı içeri uzatabilirsiniz. Ön kısmın üst tarafı, iç işlemleri kolaylaştırmak için camla donatılmıştır. Kutunun içinde ultraviyole lamba bulunur ve yan taraftaki küçük kapıdan aletler ve bakteriler içeri konulabilir.
Aseptik ameliyat teknikleri günümüzde sadece mikrobiyolojik araştırma ve uygulamalarda değil, birçok biyoteknolojide de yaygın olarak kullanılmaktadır. Örneğin, transgenik teknoloji, monoklonal antikor teknolojisi vb.
Yayın tarihi: 06 Mart 2024